临床外科杂志 ›› 2025, Vol. 33 ›› Issue (9): 974-980.doi: 10.3969/j.issn.1005-6483.20241040
李广鑫 权慧娟 高志娟 王肖君 李良 曹玉庆 刘东生
LI Guangxin*,QUAN Huijuan,GAO Zhijuan,WANG Xiaojun,LI Liang,CAO Yuqing,LIU Dongsheng
摘要: 目的 探讨长链非编码RNA MAGI2反义链RNA3(lncRNA MAGI2-AS3)调节miR-194-5p/小窝蛋白-1(CAV1)轴对胃癌(GCa)细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 2022年8月~2023年12月行手术切除的GCa病人52例,收集癌组织及癌旁组织标本,体外培养AGS、MKN45、HGC-27、GES1细胞,qRT-PCR检测组织样本及细胞系中MAGI2-AS3、miR-194-5p和CAV1表达。将AGS细胞分为AGS组,sh-AGS组,sh-MAGI2-AS3组,miR-NC组,in-miR-194-5p组。比较各组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况。免疫印迹法分析各组细胞钙黏蛋白E(E-cadherin)、CAV1、增殖细胞核抗原(PCNA)、钙黏蛋白N(N-cadherin)、Bax、基质金属蛋白酶2(MMP2)、波形蛋白(vimentin)表达。双荧光素酶实验分析MAGI2-AS3与miR-194-5p、miR-194-5p与CAV1间的关系。结果 GCa组织中MAGI2-AS3 mRNA表达、CAV1 mRNA表达和CAV1蛋白阳性表达率升高,miR-194-5p mRNA表达降低(P<0.05)。HGC-27、MKN45、AGS细胞中MAGI2-AS3 mRNA表达、CAV1 mRNA表达和CAV1蛋白表达较GES1细胞增加,miR-194-5p mRNA表达较GES1细胞降低(P<0.05)。与AGS组和sh-AGS组比较,sh-MAGI2-AS3组细胞吸光度、克隆数、侵袭和迁移数、CAV1、PCNA、N-cadherin、MMP2、vimentin表达降低,凋亡率、E-cadherin、Bax表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-NC组和sh-MAGI2-AS3组比较,in-miR-194-5p组细胞吸光度、克隆数、侵袭和迁移数、CAV1、PCNA、N-cadherin、MMP2、vimentin表达升高,凋亡率、E-cadherin、Bax表达降低(P<0.05)。ENCORI数据库显示,MAGI2-AS3与miR-194-5p、miR-194-5p与CAV1间存在多个结合位点。与WT-MAGI2-AS3+miR-NC组比,WT-MAGI2-AS3+miR-194-5p组荧光素酶活性下降(P<0.05),与WT-CAV1+miR-NC组比,WT-CAV1+miR-194-5p组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论 LncRNA MAGI2-AS3沉默能靶向miR-194-5p下调CAV1,从而抑制GCa细胞迁移、侵袭和EMT。
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